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技術(shù)文章

PCR儀使用時(shí)主要考慮的因素有哪些?

那么下面上海金鵬分析儀器有限公司為大家簡(jiǎn)單介紹一下關(guān)于PCR儀的一些主要需要考慮的因素做簡(jiǎn)單的說(shuō)明:
 
1、樣本管的種類:
     現(xiàn)在主要有0.2ml和0.5ml兩種,使用0.5ml PCR管的人員已經(jīng)很少了,一是0.5ml PCR專用的薄壁管很少見(jiàn),二是如果想要較大體積的PCR產(chǎn)物,可以通過(guò)多分幾個(gè)0.2ml PCR管來(lái)實(shí)現(xiàn)。 除非經(jīng)常需要較大體積的PCR產(chǎn)物,否則可以不必考慮0.5ml型的PCR儀  
2、樣本容量:
     種類很多,0.2ml的有96孔和48孔,0.5ml的有60孔和30孔,384孔等,當(dāng)然還有一些其他組合:如0.2ml的48孔與0.5ml的30孔組合。
3、溫度梯度功能:
     即不同列或不同行之間溫度可以為不同的溫度。這一功能對(duì)于固定PCR程序的檢驗(yàn)人員來(lái)講,可能用處不大,但對(duì)于經(jīng)常進(jìn)行不同基因擴(kuò)增的研究人員來(lái)講可以說(shuō)是必須的。
4、計(jì)算控溫與模塊控溫:
  模塊控溫是早期PCR儀所使用的控溫方式,即所設(shè)定的溫度為加熱模塊的溫度,在變溫過(guò)程中,快要達(dá)到目標(biāo)溫度時(shí),PCR儀將升降溫速率降低,讓模塊的溫度慢慢接近目的溫度,而不發(fā)生過(guò)沖。計(jì)算控溫也稱為管式控溫,即考慮的是PCR反應(yīng)管中的溫度,為了加快使反應(yīng)管中溫度達(dá)到目的溫度,模塊溫度先過(guò)沖,然后在反應(yīng)管中溫度接近達(dá)到目的溫度時(shí)調(diào)節(jié)到合適的溫度,調(diào)節(jié)方式是通過(guò)理論計(jì)算與實(shí)驗(yàn)相結(jié)合而來(lái)的,與反應(yīng)管中的反應(yīng)液的體積有關(guān),因此計(jì)算控溫模式都需要實(shí)驗(yàn)人員輸入反應(yīng)液的體積。計(jì)算控溫模式已經(jīng)是普遍采用的方式了。
5、斷電保護(hù)功能:
  這也是一個(gè)很有用的功能,特別是在中小城市,經(jīng)常會(huì)發(fā)生短時(shí)間停電、保險(xiǎn)絲融斷以及空氣開(kāi)關(guān)跳閘等現(xiàn)象,如果沒(méi)有這一功能,開(kāi)機(jī)后不能自動(dòng)接下來(lái)進(jìn)行實(shí)驗(yàn),往往會(huì)影響工作
6、熱蓋功能:
   熱蓋功能是各個(gè)廠家都有的,如果沒(méi)有,怕是沒(méi)人要了。熱蓋也分為可調(diào)式熱蓋和不可調(diào)式熱蓋??烧{(diào)式熱蓋中又有力矩式可調(diào)熱蓋,主要解決在壓緊熱蓋時(shí)用力過(guò)大及過(guò)小的問(wèn)題。
7、軟件功能:
   儀器軟件功能方面當(dāng)然都可以設(shè)置PCR程序了,只是方便不方便的問(wèn)題,用熟了便方便了,差別都不大。只是有的顯示屏大些,可以畫(huà)出一個(gè)溫度變化曲線來(lái),但大都是模擬的,意義也不大,只是好看些。還有如每個(gè)循環(huán)增減溫度以及增減時(shí)間的功能,好像多數(shù)儀器都有,如有這方面的需要?jiǎng)t要注意一下。
8、使用壽命:
   儀器的使用壽命,如果不考慮維修的成本,則主要與半導(dǎo)體制冷片的壽命相關(guān)。
9、電源可靠性:
   這是一個(gè)很重要的因素,但也是用戶有所忽視一個(gè)因素。因?yàn)榻^大多數(shù)的儀器出現(xiàn)故障都是由于電源問(wèn)題或是電源問(wèn)題造成的。由于PCR儀是一個(gè)變溫儀器,也是一個(gè)使用時(shí)間長(zhǎng)并且經(jīng)常連續(xù)使用的儀器,有些用戶一天使用達(dá)20小時(shí)左右。電源出問(wèn)題的原因是多方面的,一是潮氣和灰塵,在國(guó)內(nèi),北方的灰塵很大,南方的潮氣很重。有時(shí)灰塵大到有些PCR儀打開(kāi)后看不到電子元件了,電路板散熱不好,造成電源部分燒壞。有時(shí)潮氣大到儀器內(nèi)可以流出水來(lái),造成電路板短路,電源部分燒壞。
10、維修成本與保修時(shí)間:
  這是一個(gè)很實(shí)際的問(wèn)題,大多數(shù)PCR儀都只保修一年,有些在用戶的要求下會(huì)增加保修時(shí)間。一般儀器的保修費(fèi)用為儀器價(jià)格的8-12%每年,所以保修也就是錢(qián)。一般來(lái)講進(jìn)口儀器的維修成本會(huì)比較高,一是配件成本本身就高,二是運(yùn)輸費(fèi)用及進(jìn)口關(guān)稅等。另外進(jìn)口儀器廠家一般都不允許進(jìn)行原件級(jí)的維修,是出于利潤(rùn)以及質(zhì)量?jī)煞矫娴目紤],其實(shí)國(guó)外元件級(jí)維修的成本也許比更換電路板成本還高。因此只有國(guó)內(nèi)人員才進(jìn)行元件級(jí)的維修,國(guó)內(nèi)人力成本低,水平也高些。
11、溫度的準(zhǔn)確性與jingque性:
準(zhǔn)確性與jingque性都是有標(biāo)準(zhǔn)定義的。jingque性也稱jingque度(precision),指調(diào)查或試驗(yàn)中同一指標(biāo)或性狀的重復(fù)觀測(cè)值彼此接近程度的大小。就PCR儀來(lái)講,準(zhǔn)確性指的是設(shè)定溫度與實(shí)際溫度差別的大小,而jingque性則是指不同孔間溫度的差別。一般來(lái)講,加熱模塊的中心溫度的準(zhǔn)確性和jingque性都要好些。
12、升降溫速率:
這是很多的購(gòu)買(mǎi)者關(guān)心的問(wèn)題,它可能會(huì)影響PCR反應(yīng)時(shí)間。但在這個(gè)問(wèn)題上有些理解上的差別。一般儀器所標(biāo)注都是大升降溫速率,而用戶所理解的是溫度差與升降溫所用時(shí)間比值。這是有些用戶發(fā)現(xiàn)升降溫速率達(dá)不到儀器所標(biāo)注的速率的原因。用戶所關(guān)心的是對(duì)用戶來(lái)講有意義的。過(guò)度的升降溫速率對(duì)于用戶來(lái)講意義不大,因?yàn)槿菀滓l(fā)溫度過(guò)沖,并需要較長(zhǎng)時(shí)間來(lái)調(diào)整。
13 、其他:
如噪音大小、外觀等也是需要考慮的。噪音就不必講了,當(dāng)然是越小越好。外觀上各有所好,也不好評(píng)說(shuō),但在國(guó)內(nèi)還需要考慮的有是否顯臟。
 
以上就是上海金鵬分析儀器有限公司為大家整理總結(jié)關(guān)于PCR儀的一些主要需要考慮的因素做簡(jiǎn)單的說(shuō)明。
 
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