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什么是層析法

層析法又稱色層分析法或色譜法(Chromatography),它是在1903-1906年由俄國植物學(xué)家M. Tswett首先系統(tǒng)提出來的。他將葉綠素的石油醚溶液通過CaCO3管柱,并繼續(xù)以石油醚淋洗,由于CaCO3對葉綠素中各種色素的吸附能力不同,色素被逐漸分離,在管柱中出現(xiàn)了不同顏色的譜帶或稱色譜圖(Chromatogram)。

當(dāng)時(shí)這種方法并沒引起人們的足夠注意,直到1931年將該方法應(yīng)用到分離復(fù)雜的有機(jī)混合物,人們才發(fā)現(xiàn)了它的廣泛用途。隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展以及生產(chǎn)實(shí)踐的需要,層析技術(shù)也得到了迅速的發(fā)展。為此作出重要貢獻(xiàn)的當(dāng)推英國生物學(xué)家Martin和Synge。他們首先提出了色譜塔板理論。這是在色譜柱操作參數(shù)基礎(chǔ)上模擬蒸餾理論,以理論塔板來表示分離效率,定量的描述、評價(jià)層析分離過程。其次,他們根據(jù)液-液逆流萃取的原理,發(fā)明了液-液分配色譜。

特別是他們提出了遠(yuǎn)見卓識的預(yù)言:一、流動(dòng)相可用氣體代替液體,與液體相比,物質(zhì)間的作用力減小了,這對分離更有好處;二、使用非常細(xì)的顆粒填料并在柱兩端施加較大的壓差,應(yīng)能得到較小的理論塔板高(即增加了理論塔板數(shù)),這將會大大提高分離效率。前者預(yù)見了氣相色譜的產(chǎn)生,并在1952年誕生了氣相色譜儀,它給揮發(fā)性的化合物的分離測定帶來了劃時(shí)代的變革;后者預(yù)見了液相色譜(HPLC)的產(chǎn)生,在60年代末也為人們所實(shí)現(xiàn),現(xiàn)在HPLC已成為生物化學(xué)與分子生物學(xué)、化學(xué)等領(lǐng)域不可缺少的分析分離工具之一。因此, Martin和Synge于1952年被授予諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)。如今的色層分析法經(jīng)常用于分離無色的物質(zhì),已沒有顏色這個(gè)特殊的含義。但色譜法或色層分析法這個(gè)名字仍保留下來沿用?,F(xiàn)在我們簡稱為層析法或?qū)游黾夹g(shù)。

層析法的特點(diǎn)是分離效率高,它能分離各種性質(zhì)相類似的物質(zhì)。而且它既可以用于少量物質(zhì)的分析鑒定,又可用于大量物質(zhì)的分離純化制備。因此,作為一種重要的分析分離手段與方法,它廣泛地應(yīng)用于科學(xué)研究與工業(yè)生產(chǎn)上?,F(xiàn)在,它在石油、化工、醫(yī)藥衛(wèi)生、生物科學(xué)、環(huán)境科學(xué)、農(nóng)業(yè)科學(xué)等領(lǐng)域都發(fā)揮著十分重要的作用。
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