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電泳的目的
那么下面上海金鵬分析儀器有限公司為大家簡(jiǎn)單介紹一下關(guān)于電泳的目的:
電泳是一種功能強(qiáng)大且便宜的分子分離技術(shù)。存在進(jìn)行電泳的各種原因,包括與分子的非侵入性結(jié)合和分子分離的可視化??傮w而言,電泳的目的是提供一種分析物質(zhì)的準(zhǔn)確方法,例如您的血液和DNA(脫氧核糖核酸),這些物質(zhì)很難用常規(guī)方法分離。
定義
電泳是一種經(jīng)驗(yàn)技術(shù),用于根據(jù)電流中的響應(yīng)分離諸如細(xì)胞和蛋白質(zhì)等帶電分子(正負(fù))。
影響電泳的因素有很多,包括凈電荷,分子質(zhì)量,緩沖液和電泳介質(zhì),如紙或凝膠。在電泳中,分子向相反的電荷移動(dòng);例如,具有正凈電荷的蛋白質(zhì)會(huì)向電泳介質(zhì)的負(fù)極移動(dòng)。此外,質(zhì)量較小的分子比質(zhì)量較大的分子運(yùn)動(dòng)更快或分離更快。
分子結(jié)合
使用介質(zhì)的電泳有意以非侵入性方式與分子相互作用。例如,凝膠介質(zhì)與蛋白質(zhì)分子結(jié)合而不會(huì)破壞蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能。與分子結(jié)合后,通過(guò)施加電流開(kāi)始移動(dòng)或分離。此外,也可以在電泳后回收結(jié)合至培養(yǎng)基的分子。
高分辨率分離
電泳儀旨在可視化分子的分離。這可以通過(guò)各種方法來(lái)實(shí)現(xiàn),包括染色和放射自顯影。
放射自顯影使用X射線膠片在分離后可視化放射性分子(例如DNA)的位置。這種類型的可視化效果可與拍照相媲美,其中X射線就像照相機(jī)閃光燈,而X射線膠片像是用于沖洗黑白照片的膠片。在電泳中,血液中的蛋白質(zhì)等分子的照片是使用放射自顯影技術(shù)顯影的。
在染色中,在分離過(guò)程之前或之后,將諸如考馬斯藍(lán)和酰胺黑的染料與分子混合。例如,在電泳前將蛋白質(zhì)與考馬斯染料混合會(huì)產(chǎn)生染色的路徑(小點(diǎn)或線),顯示蛋白質(zhì)在分離過(guò)程中的運(yùn)動(dòng)。
定量分析
電泳儀的另一個(gè)目的是在可視化分子分離后獲得定量信息。為了獲得定量數(shù)據(jù),例如,圖像分析軟件(2D和3D渲染軟件)將電泳結(jié)果記錄為數(shù)字信號(hào)。這些信號(hào)代表分子在電泳之前和之后的位置,然后被用于“計(jì)算機(jī)”定量分析(使用計(jì)算機(jī))。
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