- 所在位置: 首頁(yè)
- 技術(shù)文章
- 薄層色譜法(三)操作
薄層色譜法(三)操作
那么下面上海金鵬分析儀器有限公司為大家簡(jiǎn)單介紹一下關(guān)于薄層色譜法(三)操作:
薄層板除另有規(guī)定外,將1份固定相和3份水在研缽中向一方向研磨混合,去除表面的氣泡后,倒入涂布器中,在玻板上平穩(wěn)地移動(dòng)涂布器進(jìn)行涂布(厚度為0.2~0.3mm),取下涂好薄層的玻板,置水平臺(tái)上于室溫下晾干,后在110℃烘30分鐘,即置有干燥劑的干燥箱中備用。使用前檢查其均勻度(可通過(guò)透射光和反射光檢視)。
手工制板一般分不含粘合劑的軟板和含粘合劑的硬板倆種。
常用吸附劑的基本情況:顆粒的大小,太大洗脫劑流速快分離效果不好,太細(xì)溶液流速太慢。一般說(shuō)來(lái)吸附性強(qiáng)的顆粒稍大,吸附性弱的顆粒稍小。氧化鋁一般在100-150目。氧化鋁分為堿性氧化鋁,適用于碳?xì)浠衔铩⑸飰A及堿性化合物的分離,一般適用于PH為9-10的環(huán)境。中性氧化鋁適用于醛、酮、醌、酯等PH約為7.5的中性物質(zhì)的分離。酸性氧化鋁適用于PH4~4.5的酸性有機(jī)酸類的分離。氧化鋁、硅膠根據(jù)活性分為五個(gè)級(jí),上等活性*高,五級(jí)*低。
黏合劑及添加劑:為了使固定相(吸附劑)牢固地附著在載板上以增加薄層的機(jī)械強(qiáng)度,有利于操作,需要時(shí)在吸附劑中加入合適的黏合劑:有時(shí)為了特殊的分離或檢出需要,要在固定相中加入某些添加劑。
薄層板的活化:硅膠板于105-110℃烘30分鐘,氧化鋁板于150-160℃烘4小時(shí),可得活性的薄層板。
點(diǎn)樣除另有規(guī)定外,用點(diǎn)樣器點(diǎn)樣于薄層板上,一般為圓點(diǎn),點(diǎn)樣基線距底邊2.0cm,樣點(diǎn)直徑及點(diǎn)間距離同紙色譜法,點(diǎn)間距離可視斑點(diǎn)擴(kuò)散情況以不影響檢出為宜。點(diǎn)樣時(shí)必須注意勿損傷薄層表面。
點(diǎn)樣直徑不超過(guò)5mm,點(diǎn)樣距離一般為1~1.5cm即可。
樣品在溶劑中的溶解度很大,原點(diǎn)將呈空心環(huán)--環(huán)形色譜效應(yīng)。因此配制樣品溶液時(shí)應(yīng)選擇對(duì)組分溶解度相對(duì)較小的溶劑。
點(diǎn)樣方式有點(diǎn)狀點(diǎn)樣和帶狀點(diǎn)樣。
以上就是上海金鵬分析儀器有限公司為大家整理總結(jié)關(guān)于薄層色譜法(三)操作。
我們上海金鵬分析儀器有限公司是專業(yè)生產(chǎn)超蛋白純化系統(tǒng)、超微量核酸蛋白測(cè)定儀、
化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)、凝膠成像分析系統(tǒng)、紫外分析儀、核酸蛋白檢測(cè)儀、紫外檢測(cè)儀、
光化學(xué)反應(yīng)儀、旋渦混合器、恒流泵、自動(dòng)部分收集器等為核心的十幾個(gè)產(chǎn)品系列的廠家,歡迎大家前來(lái)訂購(gòu)