那么下面上海金鵬分析儀器有限公司為大家簡(jiǎn)單介紹一下淺談層析實(shí)驗(yàn)中的氣泡問(wèn)題（一）：

       說(shuō)到氣泡，你可能會(huì)聯(lián)想到酣暢淋漓的可樂(lè)，通透上頭的啤酒，亦或是流光飛舞的浪漫，生活中的氣泡，似乎還帶有那么一絲美好，然而對(duì)于實(shí)驗(yàn)來(lái)說(shuō)，尤其是在大多不會(huì)配置在線脫氣單元的FPLC系統(tǒng)上做的層析實(shí)驗(yàn)，氣泡就如煩人的蒼蠅，鞋里的石子，令人如鯁在喉不吐不快，如若是重要樣品、昂貴填料，氣泡帶來(lái)的實(shí)驗(yàn)失敗那簡(jiǎn)直是小型災(zāi)難現(xiàn)場(chǎng)。那么氣泡是源自何來(lái)，而又去之何處，怎么能讓它們從我們的系統(tǒng)里消失，以下此篇，做一個(gè)小小探討，拋磚引玉，共謀對(duì)策而滅之。

關(guān)于氣泡來(lái)源，正如病從口入，無(wú)非就是進(jìn)入系統(tǒng)的開(kāi)口處：流動(dòng)相，或者流路中相對(duì)負(fù)壓處的漏點(diǎn)；如果流動(dòng)相脫氣不理想或儀器本身連接管路、組件存在問(wèn)題，流路中將形成肆意妄為的氣泡，引發(fā)一系列問(wèn)題： 

 

      1. 組分峰面積變化，峰形變化；

      2. 形成尖峰或鋸齒狀噪聲；

      3. 出現(xiàn)鬼峰 ，基線漂移波動(dòng)增大；

      4. 泵動(dòng)作失常，壓力波動(dòng)，檢測(cè)基線全抖；

      5. 填料走空，干柱；

      6. 溶解氧可能氧化樣品組分和（或）流動(dòng)相及固定相組分，使檢測(cè)失真。

實(shí)際案例

 

Fig.1 氣泡造成的UV雜峰

Fig.2 氣泡造成的系統(tǒng)壓力波動(dòng)

這些癥狀基本能覆蓋大部分的層析實(shí)驗(yàn)問(wèn)題，可見(jiàn)氣泡的破壞力和惱人程度，知己知彼方才能有的放矢，那么氣泡是如何形成的呢？流動(dòng)相中氣體形成的原因有多種，*根本的還是由于氣體在液體中達(dá)到過(guò)飽和狀態(tài)；平衡狀態(tài)時(shí)溶解空氣的量與溶液的性質(zhì)、氣體的種類有關(guān)，也與外界條件有關(guān), 主要的外界條件有以下 3 種。

 

溫 度 變 化

一般來(lái)說(shuō)，溶劑中能溶解氣體的量隨溫度的升高而降低，而當(dāng)溶劑從低溫狀態(tài)下移至高溫時(shí)，過(guò)量溶解的氣體以氣泡形式逸出。因此，緩沖液溫度的變化，較易引起氣泡的形成。

 

● 正如我們配置的緩沖液很多時(shí)候會(huì)保存于層析柜的低溫環(huán)境，當(dāng)實(shí)驗(yàn)需要使用時(shí)從層析柜中取出，在室溫環(huán)境下會(huì)帶來(lái)溫度的劇烈變化，改變氣體溶解性，進(jìn)而產(chǎn)生氣泡，影響實(shí)驗(yàn)，因此緩沖液的使用如果有溫度的變化，需要在實(shí)驗(yàn)溫度下擺放一段時(shí)間，釋放氣泡后再使用；

● 如果層析儀器是在非恒溫實(shí)驗(yàn)室，晝夜會(huì)有溫差，白天做完實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)保存，經(jīng)歷夜晚的溫度變化，第*二天系統(tǒng)里很可能會(huì)出現(xiàn)氣泡，此時(shí)實(shí)驗(yàn)之前充分System wash就非常重要，需要使用高流速將系統(tǒng)內(nèi)的氣泡吹掃出來(lái)，避免影響實(shí)驗(yàn)。

● 當(dāng)檢測(cè)器池處于較高溫度時(shí)，池中易產(chǎn)生氣泡，因?yàn)橐毫魍ㄟ^(guò)檢測(cè)器時(shí)，溫度升高而此處的壓力反而減小。如果氣泡形成于檢測(cè)器池中，則將出現(xiàn)尖峰狀或鋸齒狀的基線噪聲，甚至于完全無(wú)法測(cè)定，因此在系統(tǒng)流路中，升溫組件與流路保持相應(yīng)的溫度隔斷，系統(tǒng)流路溫度的均一性，也非常重要。

 

以上就是上海金鵬分析儀器有限公司為大家整理總結(jié)關(guān)于淺談層析實(shí)驗(yàn)中的氣泡問(wèn)題（一）。
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