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技術(shù)文章

AKTA蛋白純化系統(tǒng)的程序設(shè)定操作

AKTA蛋白純化系統(tǒng)的程序設(shè)定操作在method editor窗口點(diǎn)擊工具欄內(nèi)的method wizard,彈出窗口界面如Fig 11所示,可以分別在main selection、column以及column position三個(gè)下拉菜單中選擇所要用到的層析方法、所用到的層析柱的參數(shù)以及所安裝的層析柱在柱位選擇閥的位置,選好之后,點(diǎn)擊next按鈕進(jìn)入下一步波長(zhǎng)和溶液進(jìn)口的設(shè)定(Fig 12),在此可以設(shè)定檢測(cè)的波長(zhǎng),針對(duì)AKTA EXPLORER可以一次選擇三個(gè)波長(zhǎng)共同進(jìn)行監(jiān)控,并在此設(shè)定A泵和B泵的溶液進(jìn)口,設(shè)定好之后,點(diǎn)擊next,出現(xiàn)如Fig 13所示窗口,可以在此設(shè)定對(duì)層析柱進(jìn)行平衡的條件。
 
 
                                                      Fig 11                                                                                                Fig 12

                                                        Fig 13                                                                                    Fig 14
完成之后,點(diǎn)擊next出現(xiàn)Fig 14的窗口,在此可以設(shè)定上樣的條件,可選擇的條件包括上樣的方式,如上樣環(huán)上樣以及樣品泵上樣,對(duì)上樣的體積也要進(jìn)行設(shè)定。如果利用系統(tǒng)泵上樣,在此無法進(jìn)行設(shè)置,不過可以利用A泵和B泵的兩個(gè)進(jìn)口在后面的步驟中進(jìn)行設(shè)置。
在上步設(shè)置完成之后,點(diǎn)擊NEXT出現(xiàn)如Fig 15所示窗口,這里是針對(duì)流穿組分收集所進(jìn)行一些設(shè)置,針對(duì)安裝的不同的收集器,具體內(nèi)容可能有些差異,這里顯示的界面是在安裝了Frac-950收集器之后所出現(xiàn)的界面,設(shè)置完成點(diǎn)擊NEXT出現(xiàn)如Fig 16所示的窗口,設(shè)置目標(biāo)組分收集的一些參數(shù),點(diǎn)擊NEXT,出現(xiàn)如Fig 17所示的窗口,針對(duì)具體的洗脫條件可以進(jìn)行設(shè)置。
當(dāng)全部設(shè)置完成之后,點(diǎn)擊finish,彈出Fig 18所示的窗口,可以再一次對(duì)所進(jìn)行的設(shè)置進(jìn)行進(jìn)一步的修改,完成之后點(diǎn)擊按鈕,完成程序存盤操作。至此完成洗脫程序的設(shè)定工作,在應(yīng)用自動(dòng)洗脫程序時(shí),可在SYSTEM CONTROL窗口點(diǎn)擊文件菜單欄中的FILE→Run,在彈出的對(duì)話框中選擇目標(biāo)洗脫程序所在的位置并執(zhí)行,之后會(huì)依次彈出一些對(duì)話框,主要是再次確認(rèn)程序的設(shè)置條件,并選擇洗脫結(jié)果文件的保存位置,全部設(shè)置完之后,洗脫將自動(dòng)進(jìn)行,結(jié)果將自動(dòng)的保存在設(shè)定的文件夾中。

                                                  Fig 15                                                                                         Fig 16

                                                    Fig 17                                                                                          Fig 18

結(jié)果的瀏覽與簡(jiǎn)單處理
在純化完成后,Unicorn軟件會(huì)自動(dòng)的按照預(yù)先的設(shè)置保存結(jié)果文件,如果沒有指定,那么結(jié)果文件會(huì)保存于一個(gè)文件名以manual N開頭的文件中,N為系統(tǒng)依次生成的一個(gè)1-10之間的數(shù)字。
對(duì)于結(jié)果的瀏覽應(yīng)在evaluation窗口(Fig 19)中進(jìn)行,打開文件及對(duì)文件進(jìn)行普通編輯的菜單如Fig 20所示。
 Fig 19 Evaluation窗口 
Fig 20 純化結(jié)果普通編輯菜單

這里已經(jīng)選擇了一個(gè)純化文件,打開后,在結(jié)果瀏覽窗口點(diǎn)擊鼠標(biāo)右鍵,選擇properties,可以彈出如Fig 21所示的操作菜單,可以分別對(duì)結(jié)果進(jìn)行編輯,如改變曲線的顏色,設(shè)定橫軸或縱軸的顯示區(qū)間,進(jìn)行文本文件的編輯等等。

                                                                                         Fig 21

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